Nicotinamide adénine dinucléotide
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Le Nicotinamide adénine dinucléotide (NAD) est un coenzyme d'oxydoréduction.
Structure
Le NAD est dérivé de la vitamine PP : la nicotinamide.
La figure 1 présente la structure du NAD+ (forme réduite). Ce coenzyme n'est pas fixé sur l'apoenzyme, c'est un cosubstrat.
Mode d'action
Le coenzyme fixe réversiblement un ion H+ et un électron sur le noyau nicotinamide (figure 2) en présence d'une enzyme de la classe des oxydoréductases.
Le couple oxydant/réducteur est le suivant : <math> NAD^{+} \leftrightarrow NADH,H^{+} </math>
Intérêt en biochimie analytique
Il réside dans une propriété physique particulière, le NAD+ possède un maximum d'absorbtion en UV à 260 nm, la forme réduite (NADH) quand a lui possède un maximum d'absorbtion en UV à 260 nm et à 340 nm. En suivant l'absorbance à 340 nm, on pourra suivre l'évolution de la réaction enzymatique, une augmentation d'absorbance indique une fomation de NADH (la réaction va dans le sens de l'oxydation du substrat) tandis qu'une diminution d'absorbance indique la consomation de NADH, donc une formation de NAD+ (la réaction va dans le sens de la réduction du substrat). La courbe <math>A = f(t)_\!</math> correspond à la courbe <math>V_{i} = f(t)_\!</math> (voir Équation de Michaelis Menten). Ainsi, l'absorbance maximale correspond à la vitesse initiale maximale de l'enzyme.
Le coefficient d'extinction molaire de la forme réduite (NADH) = 3,3 103 mol-1.L.cm-1
